| 1. 难度：困难 | |||||
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某线性DNA分子含有5000个碱基对(bp)，先用限制性核酸内切酶a完全切割，再把得到的产物用限制性核酸内切酶b完全切割，得到的DNA片段大小如下表。限制性核酸内切酶a和b的识别序列和切割位点如下图所示。下列有关叙述错误的是
A. a酶与b酶切断的化学键相同 B. 该DNA分子中a酶能识别的碱基序列有3个 C. 仅用b酶切割该DNA分子至少可得到三种DNA片段 D. 限制性核酸内切酶a和b切出的DNA片段不能相互连接
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| 2. 难度：简单 | |
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采用基因工程技术将人凝血因子基因导入山羊受精卵，培育出了转基因羊。但是人凝血因子只存在于该转基因羊的乳汁中。以下有关叙述，正确的是 A. 人体细胞中凝血因子基因的碱基对数目，小于凝血因子氨基酸数目的3倍 B. 可用显微注射技术将含有人凝血因子基因的重组DNA分子导入羊的受精卵 C. 在该转基因羊中，人凝血因子基因只存在于乳腺细胞，而不存在于其他体细胞中 D. 人凝血因子基因开始转录时，在DNA连接酶的催化下以DNA分子的一条链为模板合成mRNA
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| 3. 难度：中等 | |
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胚胎工程技术包含的内容很丰富，下列与此相关的说法错误的是（ ） A. 精子获能后才能完成与卵子的受精过程 B. 受体母畜必须处于供体母畜同步发情时才能进行胚胎移植 C. 经胚胎分割技术得到的后代之间具有一半不同的遗传物质 D. 控制动物性别可使奶牛场获得更多的雌性牛犊以增加经济效益
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| 4. 难度：简单 | |
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在胚胎工程中，转基因动物培育、核移植等必须用到的两项技术是（ ） ①动物细胞培养 ②克隆 ③减数分裂 ④胚胎移植 A. ①② B. ①④ C. ②③ D. ②④
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| 5. 难度：中等 | |
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下图表示高等动物的个体发育过程，下列说法正确的是
A. 图中①过程没有发生细胞分化，②过程才开始出现细胞分化 B. 受精卵卵裂处于囊胚形成的过程中，每个细胞的体积不断增大 C. 牛、羊一般在桑椹胚或囊胚阶段才进行移植 D. 原肠胚是进行胚胎移植的最好时期
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| 6. 难度：中等 | |
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上海医学遗传研究所成功培育出第一头携带人白蛋白基因的转基因牛。他们还研究出一种可大大提高基因表达水平的新方法，使转基因动物乳汁中的药物蛋白含量提高了30多倍，标志着我国转基因研究向产业化的目标又迈进了一大步。以下与此有关的叙述中，正确的是（ ） A. 所谓“提高基因表达水平”是指设法使牛的乳腺细胞中含有更多的人白蛋白基因 B. 可将白蛋白基因导入牛的卵细胞中，通过组织培养形成转基因牛 C. 人们只在转基因牛的乳汁中才能获取人白蛋白，是因为只在转基因牛的乳腺细胞中才有人白蛋白基因 D. 运用基因工程技术让牛合成人白蛋白，该技术将导致定向变异
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| 7. 难度：中等 | |
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美国杜克大学医疗中心的一个研究小组在《科学》杂志上撰文透露，他们利用成年猪的动脉血管细胞和能够模拟胚胎环境的新型生物效应器，成功地在实验室培育出了新的动脉血管。这种血管的外形和功能与真的血管一样。这一研究成果是生物组织培养工程领域的重大进展。下列关于以上技术的叙述中，不正确的是 A. 以上技术包含动物细胞培养技术 B. 这种技术可能要利用去核卵细胞 C. 这项技术的关键是要激发血管细胞的全能性 D. 这项技术的关键是要激发血管细胞发育成血管的潜能
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| 8. 难度：中等 | |
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下列不是精子、卵细胞发生的区别是( ) A. 初级精母细胞、初级卵母细胞的形成时间 B. 减数第一次分裂和减数第二次分裂的时间连续性 C. 成熟生殖细胞是否经过变形 D. 成熟生殖细胞中染色体的数量
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| 9. 难度：中等 | |
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动物细胞体外培养时，通常要在培养基中补充一定浓度的某些物质。如图是血清对正常细胞和癌细胞培养影响的实验结果。从该图提供的信息不能获得的结论是
A. 培养基中是否补充血清对癌细胞的培养影响不大 B. 有无血清对正常细胞培养的影响不同 C. 培养基中补充血清有助于正常细胞的培养 D. 正常细胞与癌细胞的增殖速率相同
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| 10. 难度：中等 | |
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下图是获得抗虫棉的技术流程示意图。卡那霉素抗性基因（kanR）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下列叙述正确的是
A. 卡那霉素抗性基因(kanR)中有该过程所利用的限制性内切酶的识别位点 B. 愈伤组织的分化产生了不同基因型的植株 C. 构建重组质粒过程中需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶 D. 抗虫棉有性生殖后代能保持抗虫性状的稳定遗传
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| 11. 难度：中等 | |
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已知某种限制性内切酶在一线性DNA分子上有3个酶切位点,如下图中箭头所指,如果该线性DNA分子在3个酶切位点上都被该酶切断,则会产生a、b、c、d四种不同长度的DNA片段。现有多个上述线性DNA分子,若在每个DNA分子上至少有1个酶切位点被该酶切断,则从理论上讲,经该酶酶切后,这些线性DNA分子最多能产生长度不同的DNA片段种类数是 （ ）
A. 3 B. 4 C. 9 D. 12
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| 12. 难度：中等 | |
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1970年，特明和巴尔德摩证实了RNA病毒能依赖RNA合成DNA的过程，并发现了催化此过程的酶。下面为形成cDNA的过程和PCR扩增过程示意图。请根据图解分析，下列说法不正确的是
A. 催化①过程的酶是逆转录酶 B. 从图示可以看出要将碱基对之间的氢键断开可以用核酸酶H或高温处理 C. 从图中信息分析可知，②⑤过程为DNA复制，催化⑤过程的酶能耐高温 D. 如果RNA单链中有碱基100个，其中A占25%，U占15%，则通过该过程合成的一个双链DNA片段中有胞嘧啶30个
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| 13. 难度：简单 | |
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如图为哺乳动物受精卵发育过程中某一时期的示意图，下列叙述正确的是（ ）
A．此图为桑椹胚期，可作为胚胎移植的材料 B．此图中细胞还没有分化，图中①②③依次为透明带、 滋养层、内细胞团 C．胚胎从①中伸展出来的过程叫做孵化 D．进行胚胎分割时，取③中的细胞做性别鉴定
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| 14. 难度：中等 | |
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以下是制定并研究设计的“试管牛”工厂化生产技术流程，其中正确的顺序应是 ①卵母细胞的采集和培养 ②精子的采集和获能 ③受精卵培养 ④体外受精 ⑤胚胎的早期培养 A. ①②⑧④⑤ B. ①②④⑤③ C. ①②④③⑤ D. ①②⑤④③
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| 15. 难度：中等 | |
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某同学在学习“细胞工程”时，列表比较了动植物细胞工程的有关内容，你认为错误的有几处
A. 0处 B. 1处 C. 2处 D. 3处
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| 16. 难度：中等 | |
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科学家在培育抗虫棉时，经过了许多复杂的过程和不懈的努力，才获得成功。起初把苏云金芽孢杆菌的抗虫基因插入载体质粒中，然后导入棉花的受精卵中，结果抗虫基因在棉花体内没有表达。然后在插入抗虫基因的质粒中插入启动子(抗虫基因首端)，导入棉花受精卵，长成的棉花植株还是没有抗虫能力。科学家又在有启动子、抗虫基因的质粒中插入终止子(抗虫基因末端)导入棉花受精卵，结果长成的植株有抗虫能力。由以上过程推知，作为重组载体除了标记基因外，还应具备的结构是 A. 目的基因、启动子 B. 目的基因、终止子 C. 启动子、终止子 D. 目的基因、启动子、终止子
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| 17. 难度：中等 | |
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对等位基因经某种限制性核酸内切酶切割后形成的DNA片段长度存在差异，凝胶电泳分离酶切后的DNA片段，与探针杂交后可显示出不同的带谱。根据该特性，就能将它作为标记定位在基因组的某一位置上。现有一对夫妇生了四个儿女，其中1号性状特殊(如乙图)，由此可推知这四个儿女的基因型(用D、d表示)正确的是
A. 1号为XdXd B. 2号为XDY C. 3号为Dd D. 4号为dd
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| 18. 难度：中等 | |
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下面为制备单克隆抗体过程示意图，相关叙述错误的是
A. ④中的筛选是为了获得能产生多种抗体的杂交瘤细胞 B. ②中培养基未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡 C. 上图中有一处明显错误 D. ⑤可以无限增殖
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| 19. 难度：中等 | |
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设计试管婴儿未利用下列哪些技术手段( ) A. 体外受精技术 B. 胚胎移植技术 C. 植入前胚胎遗传学诊断技术 D. 转基因技术
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| 20. 难度：中等 | |
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下图表示哺乳动物胚胎发育过程的几个阶段，下列相关描述不正确的是( )
A. 图中3是透明带，7是原肠腔 B. 发育的先后顺序是甲→乙→丙 C. 1部位细胞将来发育成胎儿的各种组织 D. 甲时期的细胞属于全能细胞
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| 21. 难度：中等 | |
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受精过程的顺序为 ①第一次卵裂开始 ②释放第极体 ③顶体反应④穿越透明带 ⑤雌、雄原核的形成 ⑥核膜消失，雌雄原核融合 A. ①②③④⑤⑥ B. ③②④⑤⑥① C. ④⑤②①③⑥ D. ③④②⑤⑥①
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| 22. 难度：中等 | |
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下图是“白菜-甘蓝”杂种植株的培育过程。下列说法正确的是
A. 植物体细胞杂交技术已经能使杂种植物按照人们的需要表现出亲代的优良性状 B. 愈伤组织是由排列紧密的薄壁细胞组成 C. 上述过程中包含着有丝分裂，细胞分化和减数分裂等过程 D. “白菜-甘蓝”杂种植株具有的性状是基因选择性表达的结果
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| 23. 难度：中等 | |
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如图是利用胚胎工程技术培育优质奶牛的主要步骤，下列叙述正确的是
A. 胚胎移植可以定向改造动物遗传性状，③需移植到发情的母牛子宫内发育 B. A细胞不一定是受精卵 C. ①②两个胚胎具有不同遗传物质 D. 图中a过程包括卵裂、囊胚和原肠胚等阶段
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| 24. 难度：简单 | |
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下图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示限制性内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是
A. ①②③④ B. ①②④③ C. ①④②③ D. ①④③②
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| 25. 难度：中等 | |
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试管婴儿、试管苗和克隆羊这三者可以说是现代生物科技的杰出成果，下列对其生物学原理及技术的叙述，正确的是 A. 都属于无性生殖 B. 都应用到细胞工程的技术 C. 都一定不会发生基因突变 D. 都体现了已分化细胞的全能性
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| 26. 难度：中等 | |
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干扰素是用于治疗病毒感染和癌症的免疫活性蛋白质，若人的干扰素基因在大肠杆菌内表达，产生的抗病毒性较低且保存困难，若将第17位的半胱氨酸改造为丝氨酸，则生产出的干扰素的抗病毒性是原来的100倍，且可在-70℃条件下保存半年，下图是构建干扰素工程菌的过程示意图。回答下列问题。
(1)要改变干扰素的功能，可以考虑对干扰素的_____进行改造。对干扰素进行改造，也可直接对干扰素基因进行改造，其原因是_______________。 (2)③过程将B导入大肠杆菌，需用_____对大肠杆菌进行处理，使其处于能_____的生理状态。 (3)要检测B是否导入大肠杆菌，将③过程后的大肠杆菌先接种于含_______的培养基上，然后将在该培养基上生长的大肠杆菌接种在含____________的培养基上，在前者培养基上能生长而在后者培养基上不能生长的是导入B的工程菌。 (4)利用图中工程菌不能生产有活性的干扰素，这是因为__________。 (5)基因工程自20世纪70年代兴起之后，在短短40年间得到了飞速发展，目前成为生物科学核心技术，在农牧业、工业、环境、能源和医药卫生等方面展示出美好的前景，据相关资料回答下列有关问题：
上面是转基因抗冻番茄培育过程的部分示意图(ampr为抗氨苄青霉素基因)，甲、乙表示相关结构或细胞。Pst I酶和Sma I酶切割基因后将产生不同的黏性末端。图中甲代表的是______，乙可代表__________，可用_________和________提取鱼的抗冻蛋白基因以避免目的基因末端发生任意连接，用此二酶切割质粒产生的DNA片段有________种。
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| 27. 难度：中等 | |
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2013年4月16日国家卫生和计划生育委员会公布，全国共报告人感染H7N9禽流感确诊病例77例，其中16人已死亡，禽流感再度备受关注。医学界正在致力于研究预防H7N9禽流感病毒的疫苗和单克隆抗体。科学家决定采用基因敲除术将小鼠的Ig基因敲除，代之以人的Ig基因，然后用H7N9病毒去免疫小鼠，再经杂交瘤技术即可产生大量完全人源化抗体。下图是某科研机构的实验方案。请回答：
(1)此处基因敲除技术的受体细胞不是小鼠的受精卵，而是小鼠的_______细胞，经技术处理后的该细胞，再重新植入小鼠脾脏中增殖。 (2)小鼠B淋巴细胞用B表示，小鼠骨髓瘤细胞用A表示，在培养液中，用灭活的动物病毒作促融剂，培养液中共有______种类型的融合细胞(只考虑两两融合)。 (3)第一次筛选是选出______型的细胞(用字母组合表示)，筛选具体方法是在培养基中加入某种物质，抑制骨髓瘤细胞DNA的复制，而B细胞DNA复制虽不受影响，但增殖能力很有限，只有杂交瘤细胞可以借助B细胞DNA复制的途径继续增殖。此种培养基称为_____培养基。 (4)将能产生抗H7N9病毒的杂交瘤细胞在动物培养液中进行培养，通常该培养液需加入_____等一些天然成分。 (5)利用上述技术生产的单克隆抗体可制作成诊断盒，用于准确、快速诊断H7N9禽流感病毒的感染者，这种诊断运用了_______杂交技术。
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| 28. 难度：中等 | |
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下图为细胞融合的简略过程，请据图回答：
(1)若A、B是动物细胞，通常用_______处理获得分散的单个细胞。A、B到C的过程中，常用的不同于植物细胞融合的手段是_______。 (2)若该图是生产抗甲型流感病毒的单克隆抗体的制备过程。A为从小鼠体内获取的____，在获得此细胞之前，小鼠需注射______，图中B细胞是小鼠骨髓瘤细胞，符合要求的D细胞具有的特点是_________。 (3)若A、B是植物细胞，则之前已用_________去除了细胞壁。常用来诱导细胞融合的化学试剂是________。 (4)若A是番茄原生质体，B为马铃薯原生质体，D要再生出_______。通过植物组织培养技术把D培养成杂种植株，D个体______(填“可育”或“不育”)。这种育种方式的优点是__________________________________。
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| 29. 难度：中等 | |
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下面是畜牧业生产上培育某种优良种牛的两种方法，请分析回答下列问题。
（1）通常用_________（激素）处理B牛：处理的目的是使B牛______，从B牛体内获得的卵母细胞需要培养到_______(时期)才能与精子结合。 （2）A牛的精子必须在B牛的生殖道中经过相应的生理变化后，才能与B牛的卵细胞结合，完成受精作用，这个过程叫作______。卵子受精的标志是在卵细胞膜和透明带的间隙能够观察到___________。 （3）D牛子宫内胚胎发育过程中，细胞不断分裂，其分裂方式为______，生产上常用________期的胚胎进行胚胎移植。若希望同时获得多个性状相同的家畜个体，可以使用______技术。
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