| 1. 难度：中等 | |
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北极比目鱼中有抗冻基因，其编码的抗冻蛋白具有11个氨基酸的重复序列，该序列重复次数越多，抗冻能力越强。如图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图，据图回答下列问题：
(1)图中的①是通过 ________________方法获取了目的基因，图中的②过程需要用到的酶是________________和DNA连接酶。 (2)下列不能说明目的基因已成功导入受体细胞的是________。 A．检测受体细胞是否有质粒 B．检测受体细胞是否含有目的基因 C．检测受体细胞是否含有目的基因的表达产物 D．检测受体细胞是否含有目的基因转录出的mRNA (3)成功导入了重组质粒的番茄组织块在愈伤组织形成后，将含有愈伤组织培养物的试管放在 ________上，通过 __________培养可以分散成胚性细胞。 (4)为了检测抗冻番茄植株是否成功培育，应将该植株放在__________环境中培养。
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| 2. 难度：简单 | |
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科学家将外源目的基因与大肠杆菌的质粒进行重组，并在大肠杆菌中成功表达。下图表示构建重组质粒和筛选含目的基因的大肠杆菌的过程。请据图回答问题：
(1)步骤①和②中常用的工具酶是________________和________________。 (2)经过①和②步骤后，有些质粒上的________________基因内插入了外源目的基因，形成重组质粒。 (3)步骤③是________________的过程。为了促进该过程，应该用________处理大肠杆菌。 (4)步骤④是将三角瓶内的大肠杆菌接种到含有四环素的培养基A上培养，目的是筛选________________。能在A中生长的大肠杆菌有________种。 (5)步骤⑤是用无菌牙签挑取A上的单个菌落，分别接种到B(含氨苄青霉素和四环素)和C(含四环素)两个培养基的相同位置上。一段时间后，菌落的生长状况如上图所示。含有目的基因的菌落位于(填“B”或“C”) ________上，请在图中相应位置上圈出来。 __________
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| 3. 难度：中等 | |
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毛角蛋白Ⅱ型中间丝(KIFⅡ)基因与绒山头羊的羊绒质量密切相关。获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。
(1)获取外源基因用到的工具酶是__________，为了提高实验成功率，通常利用______技术获得大量标记的外源基因。 (2)在过程②中，用____________处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。由于人们对动物细胞所需营养物质还没有完全搞清楚，因此在培养细胞时需在培养基中加入一定量的____________，在培养过程中，应将培养瓶置于________培养。 (3)图中重组细胞的细胞核来自____________的细胞，若要获得多只相同的转基因山羊，可对图中早期胚胎进行________后进行胚胎移植。以上技术是在________(填“体内”或“体外”)完成的。 (4)下列有关基因工程的叙述正确的是________。 A．切割目的基因和载体DNA时为了获得相同的粘性末端，必须用相同的限制性核酸内切酶。 B．用基因探针可以检测目的基因是否表达 C．限制性核酸内切酶的作用只是用来提取目的基因 D．重组表达载体上含有RNA聚合酶的识别结合位点
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| 4. 难度：困难 | |
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随着科学技术的发展，人们可以根据人类的需求来改造生物的性状，在许多领域取得可喜的成果。如图是利用奶牛乳汁生产血清蛋白的图解，根据图甲回答下列问题：
(1)在此过程中涉及到的现代生物技术主要有____________、核移植技术和________技术。 (2)在形成图中③的过程中，我们称②为____________，获取②的途径有从基因文库中获取、____________。要实现②直接进入③必须借助__________。 (3)图中①一般经________________处理可以得到③，从③到④的过程中一般采用未受精的卵细胞去核后为受体，不用普通的体细胞，原因是_______________________________________。 (4)从④到⑤的过程中正确的操作方法是图乙中的__________________，把⑤送入⑥的最佳时期为__________________________。 (5)⑦是⑥的后代，但是⑦与⑥的遗传性状完全不一样，其原因是________________________。
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| 5. 难度：中等 | |||||
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下图是科学家研究良种奶牛快速繁殖的过程示意图。
请据图回答下列问题： （1）克隆牛G的性别是 。 （2）从良种公牛A采集的精子，需经 处理，才能穿入到卵细胞内部。对良种母牛B进行激素处理的目的是 。 （3）为了获得多个基因型相同的后代，可对早期胚胎进行 。 （4）胚胎移植中，需要对受体D牛进行 处理，以保证胚胎能够在受体的子宫着床、继续生长发育。 （5）克隆牛G的遗传性状与母牛B基本相同，但又不完全相同。下列有关其差异形成原因叙述中不恰当的是 。
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| 6. 难度：困难 | |
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有一种病人不能抵抗疾病，只能生活在无菌室里，如果离开无菌室，病人就会受到病毒感染而死亡，原因是其体内缺乏一种腺苷酸脱氨酶基因。其治疗方案如图所示：
(1)仿照上述方案设计一个治疗男性血友病患者的方案，请完成有关步骤： 第一步：取出患者的皮肤细胞进行细胞培养； 第二步：提取目的基因； 第三步：_________________________________________________________； 第四步：将重组DNA分子导入受体细胞，让这种携带有正常凝血因子基因的无害病毒去感染______________________________________________________________； 第五步：根据病毒上的标记基因检测皮肤细胞中是否导入正常凝血因子基因，并检测是否产生了________________________________________________________________________； 第六步：将含有目的基因的皮肤细胞扩大培养，当各种指标达到要求后，再与胶原细胞混合，制成注射针剂。将含有这种活细胞的针剂注射到患者体内，目的基因在患者体内表达，使患者的凝血因子达到可以止血的含量。 (2)取患者本人的皮肤细胞作为受体细胞进行培养，目的是_____________________________。 (3)人类血友病是由__________染色体上的________基因控制的遗传病。假如缺乏腺苷酸脱氨酶基因引起的疾病属于常染色体隐性遗传病，一对表现型正常的夫妇生下一个同时患有上述两种遗传病的男孩，如果他们再生一个女孩，表现型正常的概率是________。 (4)假设以大肠杆菌质粒作为载体，并用同一种限制性核酸内切酶切割载体与目的基因，将切割后的载体与目的基因片段混合，并加入DNA连接酶。连接产物中至少有____种环状DNA分子，它们分别是_______________________________________________________________________________。
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| 7. 难度：简单 | |
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随着水体富营养化程度日趋严重，淡水湖泊藻类水华频繁发生。人工打捞和投放大量化学杀藻剂进行紧急处理是常用的治理方法。近年来，研究者采用投放食浮游植物的鱼类和种植大型挺水植物构建生物修复系统的方法，收到较好的效果。根据上述材料回答问题： （1）杀藻剂处理水华与生物修复的方法相比，主要缺点是 和 。 （2）在该修复生态系统中，主要生产者是 和 ，鱼类属于该生态系统的 。 （3）生物修复系统构建后，种间关系发生了哪些主要变化？ （4）挺水植物在该系统中的作用是 。该修复系统经过一段时间运行后，群落结构趋于稳定，群落的这个变化过程属于 。
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