| 1. 难度：中等 | |
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与“限制性核酸内切酶”作用部位完全相同的酶是（ ） A．反转录酶 B．RNA聚合酶 C．DNA连接酶 D．解旋酶
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| 2. 难度：中等 | |
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将大肠杆菌的质粒连接上人生长激素的基因后，重新导入大肠杆菌的细胞内，通过发酵就能大量生产人生长激素。下列叙述正确的是（ ）。 A．发酵产生的生长激素属于大肠杆菌的初级代谢产物。 B．大肠杆菌获得的能产生人生长激素的变异可以遗传。 C．大肠杆菌质粒标记基因中腺嘌呤与尿嘧啶含量相等。 D．生长激素基因在转录时需要解旋酶和DNA连接酶。
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| 3. 难度：中等 | |
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下列叙述符合基因工程概念的是（ ）。 A．在细胞内将DNA进行重组，赋予生物新的遗传特性 B．将人的干 C．用紫外线照射青霉菌，使其DNA发生改变，通过筛选获得青霉素高产菌株 D．自然界中天然存在的噬菌
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| 4. 难度：中等 | |
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下列一般不作为基因工程中的标记基因的是（ ） A．四环素抗性基因 B．绿色荧光蛋白基因 C．产物具有颜色反应的基因 D．贮藏蛋白的基因
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| 5. 难度：中等 | |
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对下图所示黏性末端的说法正确的是（ ）
A．甲、乙、丙黏性末端是由两种限制性核酸内切酶作用产生的 B．图乙中的酶切位点在A与G之间 C．如果甲中的G发生突变，限制性核酸内切酶可能不能识别该切割位点 D．构建基因表达载体所
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| 6. 难度：简单 | |
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以下有关DNA重组技术的基本工具的说法中，正确的是（ ） A．一种限制酶只能识别某种特定的核苷酸序列 B．质粒是基因工程中唯一的载体 C．载体必须具备的条件之 D．DNA连接酶使黏性末端的碱基之间形成氢键
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| 7. 难度：简单 | |
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甲、乙两图表示从细菌细胞中获取目的基因的两种
A．甲方法可建立该细菌的基因组文库 B．乙方法可建立该细菌的cDNA文库 C．甲方法要以脱氧核苷酸为原料 D．乙方法需要反转录酶参与
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| 8. 难度：简单 | |
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据下图分析，下列有关基因工程的说法不正确的是（ ）
A．为防止目的基因与质粒任意结合而影响基因的表达，应用限制酶Ⅰ、Ⅱ同时切割二者 B．限制酶、DNA连接酶的作用部位都是磷酸二酯键 C．与启动子结合的应该是RNA聚合酶 D．能够检测到标记
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| 9. 难度：简单 | |
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目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过鉴定和检测才能知道。下列属于目的基因检测和鉴定的是（ ） ①检测受体细胞是否有目的基因 ②检测受体细胞是否有致病基因 ③检测目的基因是否转录出信使RNA ④检测目的基因是否翻译出蛋白质
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| 10. 难度：中等 | |
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利用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类所需要的产品。下列选项中能说明目的基因完成了在受体细胞中表达的是（ ） A．棉花二倍体细胞中检测到细菌的抗虫基因 B．大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及其mRNA C．山羊乳腺细胞中检测到人生长激素DNA序列 D．酵母菌细胞中提取到人干扰素蛋白
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| 11. 难度：中等 | |
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采用基因工程的方法培育抗虫棉，下列导入目的基因的做法正确的是（ ） ①将毒素蛋白注射到棉受精卵中 ②将编码毒素蛋白的DNA序列，注射到棉受精卵中 ③将编码毒素蛋白的DNA序列，与质粒重组，导入细菌，用该细菌感染棉的体细胞，再进行组织培养 ④将编码毒素蛋白的DNA序列，与细菌质粒重组，注射到棉的子房并进入受精卵 A．①② B．②③ C．③④ D．①④
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| 12. 难度：中等 | |||||||||||||
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质粒是基因工程中最常用的载体，它存在于许多细菌体内。质粒上有标记基因（如下图所示），通过标记基因可以推知外源基因（目的基因）是否转移成功。外源基因插入的
A．①是c；②是b；③是a B．①是a和b；②是a；③是b C．①是a和b；②是b；③是a D．①是c；②是a；③
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| 13. 难度：中等 | |
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科学家将控制某药物蛋白合成的基因转移到白色来亨鸡胚胎细胞的DNA中，发育后的雌鸡就能产出含该药物蛋白的鸡蛋，在每一只鸡蛋的蛋清中都含有大量的药物蛋白；而且这些含该药物蛋白的鸡蛋孵 A．这些鸡是基因工程的产物 B．这种变异属于可遗传的变异 C．该过程属于蛋白质工程技术 D．该种变异属于定向变异
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| 14. 难度：中等 | |
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生物技术的发展速度很快，已灭绝生物的“复生”将不再是神话。如果世界上最后一头野驴刚死亡，以下较易成功“复生”野驴的方法是（ ） A．将野驴的体细胞取出，利用组织培养技术，经脱分化、再分化，培育成新个体 B．将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育成新个体 C．取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵细胞中，经孕育培育成新个体 D．将野驴的基因导入家驴的受精卵中，培育成新个体
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| 15. 难度：中等 | |
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下图表示利用高秆抗锈病玉米（基因型为AaBb，两对基因独立遗传）的花粉细胞生产人工种子的过程。下列叙述不正确的是（ ）
A．通过①过程两两融合得到的细胞基因型有9种 B．②过程需要避光处理，③过程需要适宜的光照 C．过程④需用秋水仙素处理才能获得可育的人工种子 D．人工种子的种皮中加入植物生长调节剂可促进胚状体的发育
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| 16. 难度：中等 | |
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要获得一个杂种植株,需要哪些步骤（ ） A．分离原生质体→诱导原生质体融合→组织培养→杂种植株 B．分离原生质体→原生质体融合→杂种植株→组织培养 C．获取细胞→诱导原生质体融合→杂种植株→组织培养→栽培 D．获取细胞→原生质体直接融合→组织培养→杂种植株→栽培
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| 17. 难度：中等 | |
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利用植物的茎尖、叶片或茎段等，在无菌条件下，在人工配制的培养基上培养，使它发育成完整的植株。这种技术可以用来培育植物新品种，并且可以在较短的时间内大量繁殖植物，还可以防止病毒的侵害。下列关于这种技术的叙述，不正确的是（ ） A．这种技术利用了植物细胞的全能性 B．这种技术叫做组织培养，可以克隆生物体 C．这种技术属于细胞工程的应用领域之一 D．这种技术是一种无性繁殖的方式
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| 18. 难度：中等 | |
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下列关于细胞工程的叙述，错误的是（ ） A．电刺激可以诱导植物原生质体的融合或动物细胞的融合 B．用花粉离体培养获得的抗病植株，其细胞仍具有全能性 C．通过体细胞杂交技术培育杂种植株的过程不涉及染色体数目变异 D．烟草叶片离体培养能产生新个体，小鼠杂交瘤细胞可离体培养增殖
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| 19. 难度：中等 | |
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如图是“白菜一甘蓝”杂种植株的培育过程。下列说法正确的是（ ）
A．图示“白菜—甘蓝”植株不能结籽 B．愈伤组织的代谢是自养需氧型 C．上述过程中包含着有丝分裂，细胞分化和减数分裂等过程 D．“白菜—甘蓝”杂种植株具有的性状是基因选择性表达的结果
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| 20. 难度：中等 | |
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下图表示抗人体胃癌的单克隆抗体的制备过程，有关叙述不正确的是（ ）
A．图中给实验小 B．利用聚乙二醇、灭活的病毒和电激等方法均可诱导细胞融合获得乙 C．用特定的选择培养基对乙进行筛选，融合细胞均 D．对丙需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选后可获得大量能分泌所需抗体的丁
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| 21. 难度：中等 | |
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关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述，错误的是（ ） A．动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同 B．动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用
D．动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖培养可用于植物脱毒
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| 22. 难度：中等 | |
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金茶花是中国特有的观赏品种，但易得枯萎病。科学家在某种植物中找到了抗枯萎病的基因，通过图所示的方法培育出了抗枯萎病的新品种。下列相关叙述正确的是（ ）
A．图中①②分别是基因表达载体、目的基因 B．形成③的操作中使用的酶有限制酶、DNA聚合酶和DNA连接酶 C．在⑤幼苗中检测到抗枯萎病基因标志着成功培育新品种 D．由④培育至⑤过程中，经历了脱分化、再分化过程
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| 23. 难度：中等 | |
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某兴趣小组拟用组织培养繁殖一种名贵花卉，其技术路线为“取材→消毒→愈伤组织培养→出芽→生根→移栽”。下列有关叙述，错误的是（ ） A．消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害 B．在愈伤组织培养中加入细胞融合的诱导剂，可获得染色体加倍的细胞 C．出芽是细胞再分化的的结果，受基因选择性表达的调控 D．生根时，培养基通常应含α萘乙酸等生长素类调节剂
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| 24. 难度：中等 | |
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新技术的建立和应用对生物学发展至关重要。下列技术（或仪器）与应用匹配正确的是（ ） A．PCR技术——扩增蛋白质 B．杂交瘤技术——制备单克隆抗体 C．光学显微镜——观察叶绿体的基粒 D．花粉离体培养——培育多倍体植物
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| 25. 难度：中等 | |
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红江橙种植几年后往往容易积累病毒导致品种退化。在生产上可采用茎尖分生组织离体培养的方法快速繁殖脱毒的种苗，以保证该品种的品质和产量水平。这种通过分生组织离体培养获得种苗的过程不涉及细胞的（ ） A．有丝分裂和分化 B．染色体变化和细胞全能性 C．减数分裂和配子的形成 D．DNA的复制和表达
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| 26. 难度：中等 | |
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下图为单克隆抗体制备流程示意图。
（1）单克隆抗体制备技术的基础是 、 。 （2）图中某些淋巴细胞主要来自已免疫小鼠的 。细胞融合是随机的过程，在HAT培养基中培养，目的是 。 （3）在培养细胞过程中，培养液中需要添加葡萄糖,氨基酸， ，无机盐，微量元素等营养物质，但要注意无机盐的种类和数量，以保证生命活动的正常进行。 （4）单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是 。 （5）为选育出能产生高特异性抗体的细胞，要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释到7～10个细胞/mL，每孔滴入0．1 mL细胞稀释液，其目的是 。
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| 27. 难度：中等 | |
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阅读如下材料： 材料甲：科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵在，得到了体型巨大的“超级小鼠”；科学家采用农杆菌转化法培育出转基因烟草。 材料乙：T4溶菌酶在温度较高时易失去活性，科学家对编码T4溶菌酶的基因进行改造，使其表达的T4溶菌酶的第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸，在该半胱氨酸与第97为的半胱氨酸之间形成了一个二硫键，提高了T4溶菌酶的耐热性。 回答下列问题： （1）材料甲属于基因工程的范畴。将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用 法。构建基因表达载体常用的工具酶有 和 。基因表达载体除了目的基因外，还应包括 ， ， 。在培育转基因植物时，常用农杆菌转化法，农杆菌的作用是 。 （2）材料乙属于 工程范畴。该工程是指以分子生物学相关理论为基础，通过基因修饰或基因合成，对 进行改造，或制造一种 的技术。在该实例中，引起T4溶菌酶空间结构改变的原因是组成该酶肽链的 序列发生了改变。
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| 28. 难度：中等 | |
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花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力。再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，以获得抗黑腐病杂种植株。流程如下图。
据图回答下列问题： （1）过程①所需的酶是 。 （2）过程②后，在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的 存在，这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。 （3）原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是 。原生质体经过 （4）若分析再生植株的染色体变异类型，应剪取再生植株和 植株的根尖，通过 、 、染色和制片等过程制成装片，然后在显微镜下观察比较染色体的形态和数目。 （5）采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组DNA 进行PCR 扩增，得到两亲本的差异性条带，可用于杂种植株的鉴定。下图是用该引物对双亲及再生植株1—4 进行PCR 扩增的结果。据图判断，再生植株1—4 中一定是杂种植株的有 。
（6）对杂种植株进行 接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株。
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| 29. 难度：中等 | |
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许多大肠杆菌的质粒上含有lacZ基因，其编码的产物β-半乳糖苷酶在X-gal和IPTG存在下，可以产生蓝色沉淀，使菌落呈现蓝色，否则菌落呈现白色。基因工程中常利用该原理从导入质粒的受体细胞中筛选出真正导入重组质粒的细胞，过程如下图。请据图回答： （1）基因工程中，构建基因表达载体的目的是 。 （2）限制酶EcoRⅠ的识别序列和切点是—G↓AATTC—，SmaⅠ的识别序列和切点是—CCC↓GGG—。图中目的基因被切割下来和质粒连接之前，需在目的基因的右侧连接相应的末端，连接的末端序列是 （3）转化过程中，大肠杆菌应先用 处理，使其处于能吸收周围DNA的状态。 （4）菌落的颜色为白色的是 ，原因是 。 （5）菌落③中的目的基因是否能表达，可采用的检测办法是 。
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