| 1. 难度：中等 | |
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下列关于基因工程的叙述，错误的是( )。 A．目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物 B．限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶 C．人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性 D．载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达
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| 2. 难度：中等 | |
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下列关于限制酶的说法正确的是( )。 A．限制酶广泛存在于各种生物中，微生物中很少分布 B．一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 C．不同的限制酶切割DNA后都会形成黏性末端 D．限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的氢键
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| 3. 难度：简单 | |
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工程菌是指( )。 A．用物理或化学方法，诱发菌类自身某些基因得到高效表达的菌类细胞株系 B．用遗传工程的方法，使同种不同株系的菌类杂交，得到的新细胞株系 C．用基因工程的方法，使外源基因得到高效率表达的菌类细胞株系 D．从自然界中选取能迅速增殖的菌类
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| 4. 难度：中等 | |
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一个双链DNA经一限制酶切割一次形成的黏性末端个数为( )。 A．1 B．2 C．3 D．4
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| 5. 难度：中等 | |||||||||||||||||||||
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下表有关基因表达的选项中，不可能的是( )。
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| 6. 难度：中等 | |
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在基因工程中，为将目的基因导入受体细胞常采用土壤农杆菌转化法，在土壤农杆菌中常含有一个Ti质粒。某科研小组欲将某抗虫基因导入某植物，下列分析错误的是( )。 A．Ti质粒含有对宿主细胞生存具有决定性作用的基因，是基因工程中重要的载体 B．用Ca2＋处理细菌是重组Ti质粒导入土壤农杆菌中的重要方法 C．重组Ti质粒的土壤农杆菌成功感染植物细胞，可通过植物组织培养技术将该细胞培养成具有抗虫性状的植物 D．若能够在植物细胞中检测到抗虫基因，则说明将重组质粒成功地导入到了受体细胞
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| 7. 难度：中等 | |
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基因工程技术也称DNA重组技术，其实施必须具备的4个必要条件是( )。 A．工具酶、目的基因、载体、受体细胞 B．重组DNA、RNA聚合酶、限制性内切酶、DNA连接酶 C．模板DNA、信使RNA、质粒、受体细胞 D．目的基因、限制性内切酶、载体、受体细胞
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| 8. 难度：简单 | |
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干扰素是治疗癌症的重要药物，它必须从血液中提取，每升人血中只能提取0.5μg，所以价格昂贵。美国加利福尼亚的某生物制品公司用如下方法(如图所示)生产干扰素。
从上述方式中可以看出该公司生产干扰素运用的方法是( )。 A．个体间的杂交 B．基因工程 C．蛋白质工程 D．器官移植
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| 9. 难度：简单 | |
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在基因工程中，若受体细胞是细菌，则用来处理该细菌以增强细胞壁通透性的化学试剂是( )。 A．氯化钠 B．聚乙二醇 C．氯化钙 D．二苯胺
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| 10. 难度：中等 | |
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下图表示基因工程中获取水稻某目的基因的不同方法。下列相关叙述中正确的是( )。
A．这三种方法都用到酶，都是在体外进行 B．①②③碱基对的排列顺序均相同 C．图示a、b、c三种方法均属人工合成法 D．方法a不遵循中心法则
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| 11. 难度：中等 | |
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上海医学遗传研究所成功培育出第一头携带人白蛋白的转基因牛，他们还研究出一种可大大提高基因表达水平的新方法，使转基因动物乳汁中的药物蛋白含量提高30多倍。标志着我国转基因研究向产业化的目标又迈进了一大步。下列有关的叙述中，正确的是( )。 A．所谓“提高基因表达水平”是指设法使牛的乳腺细胞中含有更多的人白蛋白基因 B．可将白蛋白基因导入牛的卵细胞中，通过组织培养形成转基因牛 C．人们只在转基因牛的乳汁中才能获取人白蛋白，是因为只在转基因牛的乳腺细胞中才有人白蛋白基因 D．运用基因工程技术让牛合成人白蛋白，该技术将导致定向变异
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| 12. 难度：中等 | |
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基因工程与蛋白质工程的区别是( )。 A．基因工程需对基因进行分子水平操作，蛋白质工程不对基因进行操作 B．基因工程合成自然界已存在的蛋白质，蛋白质工程可以合成自然界不存在的蛋白质 C．基因工程是分子水平操作，蛋白质工程是细胞水平(或性状水平)的操作 D．基因工程完全不同于蛋白质工程
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| 13. 难度：中等 | |
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农杆菌转化法是将目的基因导入植物细胞采用最多的方法。下图为农杆菌转化法示意图，请据图回答问题。
(1)Ti质粒多存在于细菌中，它是能自我复制的________。 (2)获取外源基因(目的基因)需要限制酶的参与，而目的基因在重组过程中需要________酶的参与，并依据碱基________原则进行重组。 (3)Ti质粒原存在于________中，其上的TDNA具有可转移到受体细胞并整合到受体细胞的________上的特点，因此携带外源基因的DNA片段必须插入到________部位。 (4)农杆菌转化法适于将目的基因导入________和祼子植物，而不易于感染大多数________。 (5)若将相关的目的基因导入动物细胞或微生物细胞则常采用________和________。
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| 14. 难度：中等 | |
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2011年11月，武汉大学利用细菌将人的血清白蛋白基因导入水稻体内，借助水稻合成了人的血清白蛋白，这种蛋白质和人体自然产生的这类物质是完全一致的，这一成果轰动了生物界。结合图示回答转基因水稻培育过程的相关问题。
(1)限制酶Mun Ⅰ和限制酶EcoRⅠ的识别序列及切割位点分别是—C↓AATTG—和—G↓AATTC—。为保证重组质粒表达载体的准确构建，应该怎样操作？______，________，________。 (2)②过程常用的细菌是________。 (3)③经历的生理过程主要有________和________两个阶段。培育出转基因水稻完整个体所依据的生物学原理是__________________________________。 (4)基因工程的最后步骤是目的基因的检测与鉴定，在此步骤可对培育的植株进行分子水平的检测，可检测的物质有______________、____________、______________。
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| 15. 难度：中等 | |
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已知SARS是由一种RNA病毒感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康复后的血清中有抗S蛋白的特异性抗体。某研究小组为了研制预防SARS病毒的疫苗，开展了前期研究工作。其简要的操作流程如下：
(1)实验步骤①所代表的反应过程是____________________________________。 (2)步骤②构建重组表达载体A和重组表达载体B必须使用_____________________________________________________________。 (3)如果省略步骤②而将大量扩增的S基因直接导入大肠杆菌，一般情况下，不能得到表达的S蛋白，其原因是S基因在大肠杆菌中不能________，也不能______________。 (4)为了检验步骤④所表达的S蛋白是否与病毒S蛋白有相同的免疫反应特征，可用________与________进行抗原—抗体特异性反应实验，从而得出结论。 (5)步骤④和⑥的结果相比，原核细胞表达的S蛋白与真核细胞表达的S蛋白的氨基酸序列________(选填“相同”或“不同”)，根本原因是_________________________________________________________________。
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| 16. 难度：中等 | |
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在DNA连接酶的催化下形成的化学键和位置分别是( )。 A．氢键 碱基与脱氧核糖之间 B．氢键 碱基与碱基之间 C．磷酸二酯键 磷酸与脱氧核糖之间 D．磷酸二酯键 脱氧核糖与碱基之间
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| 17. 难度：简单 | |
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从基因文库中获取目的基因的根据是( )。 A．基因的核苷酸序列 B．基因的功能 C．基因的转录产物mRNA D．以上都是
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| 18. 难度：中等 | |
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下列有关基因工程操作的叙述，正确的是( )。 A．用同种限制性核酸内切酶切割载体与目的基因可获得相同的黏性末端 B．以蛋白质的氨基酸序列为依据合成的目的基因与原基因的碱基序列相同 C．检测到受体细胞含有目的基因就标志着基因工程操作的成功 D．用含抗生素抗性基因的质粒作为载体是因为其抗性基因便于与外源基因连接
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| 19. 难度：中等 | |
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下列关于基因文库的说法，错误的是( )。 A．可分为基因组文库和部分基因文库 B．cDNA文库属于部分基因文库 C．基因组文库的基因在不同物种之间均可进行基因交流 D．同种生物的cDNA文库基因数量较基因组文库基因数量少
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| 20. 难度：中等 | |
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下列关于DNA连接酶的叙述正确的是( )。 ①催化相同黏性末端的DNA片段之间的连接 ②催化不同黏性末端的DNA片段之间的连接 ③催化两个黏性末端互补碱基间氢键的形成 ④催化两个核苷酸之间的磷酸二酯键的形成 A．①③ B．②④ C．②③ D．①④
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| 21. 难度：中等 | |
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科学家在培育抗虫棉时，经过了许多复杂的过程和不懈的努力，才获得成功。起初把苏云金芽孢杆菌的抗虫基因插入载体质粒中，然后导入棉花的受精卵中，结果抗虫基因在棉花体内没有表达。之后在插入抗虫基因的质粒中插入启动子(抗虫基因首端)，导入棉花受精卵，长成的棉花植株还是没有抗虫能力。科学家又在有启动子、抗虫基因的质粒中插入终止子(抗虫基因末端)，导入棉花受精卵，结果长成的植株有了抗虫能力。那么作为重组的载体应具备的结构是( )。 A．目的基因、启动子、标记基因 B．目的基因、终止子、标记基因 C．目的基因、启动子、终止子、标记基因 D．启动子、终止子、标记基因
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| 22. 难度：简单 | |
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下列黏性末端属于同种限制性核酸内切酶切割而成的是( )。
A．①② B．①③ C．①④ D．②③
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| 23. 难度：中等 | |||||
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某线性DNA分子含有3 000个碱基对(bp)，先用限制酶a切割，再把得到的产物用限制酶b切割，得到的DNA片段大小如下表。限制酶a和b的识别序列和切割位点如图所示。下列有关说法正确的是( )。
A.在该DNA分子中，a酶与b酶的识别序列分别有3个和2个 B．a酶与b酶切出的黏性末端不能相互连接 C．a酶与b酶切断的化学键分别为磷酸二酯键和氢键 D．用这两种酶和DNA连接酶对该DNA分子进行反复切割、连接操作，若干循环后，
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| 24. 难度：简单 | |
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检测转基因生物是否转录出mRNA，应通过何种分子杂交方法实现( )。 A．DNA—DNA杂交 B．DNA—RNA杂交 C．RNA—蛋白质杂交 D．蛋白质—蛋白质杂交
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| 25. 难度：中等 | |
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在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是( )。 A．用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸 B．用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体 C．将重组DNA分子导入烟草原生质体 D．用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞
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| 26. 难度：简单 | |
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现有一长度为1000碱基对(bp)的DNA分子，用限制性核酸内切酶EcoRⅠ单独酶切后得到的DNA分子仍是1000 bp，用Kpn Ⅰ单独酶切得到400 bp和600 bp两种长度的DNA分子，用EcoR Ⅰ、Kpn Ⅰ同时酶切后得到200 bp和600 bp两种长度的DNA分子，该DNA分子的酶切图谱(如图所示)正确的是( )。
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| 27. 难度：中等 | |
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下列技术依据DNA分子杂交原理的是( )。 ①观察DNA在细胞中的分布 ②检测目的基因是否导入细胞 ③检测目的基因是否翻译 ④检测目的基因是否进行转录 A．②③ B．①③ C．②④ D．①④
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| 28. 难度：中等 | |
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下图表示从苏云金芽孢杆菌分离出来的杀虫晶体蛋白质基因(简称Bt基因)及形成转基因抗虫棉的图解。请据图回答下面的问题。
(1)图中a过程要用到的酶是_______________________________________。 (2)在进行图中b过程时，由我国科学家独创的十分简便经济的方法是________，此外，也经常采用________法。若要培育转基因绵羊，则此过程要用________的方法。 (3)为确定抗虫棉是否培育成功，既要用放射性同位素标记的________作探针进行分子杂交测试，又要在个体水平上鉴定，后者具体过程是_________________________________________________________________。 (4)活化的毒性物质应是一种________分子，可以全部或部分嵌合于昆虫的细胞膜上，使细胞膜产生孔道，导致细胞由于渗透平衡的破坏而破裂。 (5)我国在“863”计划资助下开展Bt抗虫棉、抗虫水稻等研究，可以减少农药、杀虫剂的使用。这将对________起到重要作用。
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| 29. 难度：中等 | |
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科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高，可以在相对寒冷的环境中生长。下图是转基因抗冻番茄的培育过程示意图。
(1)若图中Ⅱ是科学家构建的鱼抗冻蛋白基因的表达载体，则该基因表达载体的组成通常应包括____________________等。 (2)科学家常采用________法将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞内。通常采用________技术检测目的基因是否插入番茄的基因组。 (3)多聚半乳糖醛酸酶(PG酶)可将成熟的番茄果实细胞壁中的多聚半乳糖醛酸降解为半乳糖醛酸，从而导致果实软化。抑制PG酶的活性可以延长番茄果实储藏期，请用文字描述采用蛋白质工程技术降低该酶活性的一般过程。 _______________________________________________________________________________ _____________________________________________________ _________________________________________________________________。
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| 30. 难度：中等 | |
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肺细胞中的let7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let7基因导入肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图1。
图1
图2 请回答有关问题。 (1)进行过程①时，需用________酶切开载体以插入let7基因。 (2)进行过程②时，需用______酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。 (3)研究发现，let7基因能影响癌基因RAS的表达，其影响机理如图2。据图分析，可从细胞中提取______进行分子杂交，以直接检测let7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中______(RAS mRNA/RAS蛋白)含量减少引起的。
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