| 1. 难度：中等 | |
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将ada(腺苷酸脱氨酶基因)通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。下列叙述正确的是 A．每个大肠杆菌细胞一定含多个重组质粒 B．每个重组质粒只含一个限制性核酸内切酶识别位点 C．每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个ada D．每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子
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| 2. 难度：中等 | |
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聚合酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般经历下述30多次循环：95℃下使模板DNA变性、解链→55 ℃下复性(引物与DNA模板链结合)→72 ℃下引物链延伸(形成新的脱氧核苷酸链)。下列有关PCR过程的叙述中不正确的是 A．95℃高温破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键 B．复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成 C．延伸过程中需要热稳定DNA聚合酶和四种dNTP D．引物为一小段RNA
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| 3. 难度：简单 | |
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下列关于基因表达载体构建的相关叙述，不正确的是 A．需要限制酶和DNA连接酶 B．必须在细胞内进行 C．抗生素抗性基因可作为标记基因 D．启动子位于目的基因的首端
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| 4. 难度：中等 | |
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基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是－G↓GATCC－，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是－↓GATC－。根据图判断下列操作正确的是
A．目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割 B．目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割 C．质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割 D．质粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割
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| 5. 难度：中等 | |
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下列实践活动包含基因工程技术的是 A.水稻F1花药经培养和染色体加倍，获得基因型纯合新品种 B.抗虫小麦与矮秆小麦杂交，通过基因重组获得抗虫矮秆小麦 C.将含抗病基因的重组DNA导入玉米细胞，经组织培养获得抗病植株 D.用射线照射大豆使其基因结构发生改变，获得种子性状发生变异的大豆
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| 6. 难度：中等 | |
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若某种限制性核酸内切酶的识别序列是CCTAGG，它在A和G之间切断DNA。下图表示用该酶处理某基因后产生的片段。下列有关叙述错误的是
A．该正常基因中有3个CCTAGG序列 B．产生的DNA片段可用DNA连接酶连接起来 C．用该酶处理得到图示基因片段要水解6个磷酸二酯键 D．若该基因某处有一个CCTAGC突变为CCTAGG，用该酶处理后将产生5个切口，5个片断
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| 7. 难度：中等 | |
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下列哪一种方法不能用于检测目的基因是否成功导入或表达 A．将目的基因直接打上放射性标记，导入受体细胞后用检测仪跟踪 B．在含某种抗生素的培养基中培养导入了重组质粒的大肠杆菌 C．利用相应的DNA探针与受体细胞DNA分子进行杂交 D．提取受体细胞蛋白质，利用抗原—抗体特异性反应进行检测
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| 8. 难度：简单 | |
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关于蛋白质工程的说法，正确的是 A．蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作 B．蛋白质工程能产生出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子 C．对蛋白质的改造是通过直接改造相应的mRNA来实现的 D．蛋白质工程的流程和天然蛋白质合成的过程是相同的
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| 9. 难度：中等 | |
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下图表示某植物的培育过程，请据图判断下列说法中正确的是
A．A→F不能体现细胞的全能性 B．C中是高度液泡化的薄壁细胞 C．植株A和F中的染色体组数相同 D．植株F一般可直接应用于生产
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| 10. 难度：中等 | |
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在植物组织培养过程中，容易获得突变体的主要原因是 A．培养的细胞一直处于不断分生的状态 B．培养基营养丰富，易于植物生长 C．纺锤丝的形成容易受抑制 D．DNA复制容易受抑制
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| 11. 难度：中等 | |
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人工种子比天然种子有许多优越性，下列对其优越性的叙述不正确的是 A．可使自然状态下不结子的植物得以繁殖 B．方便储藏和运输 C．可以随意改变植物的遗传性状 D．可快速、大量繁殖
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| 12. 难度：中等 | |
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下列与动物细胞培养有关的表述中，不正确的是 A．培养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清 B．原代培养的细胞一般传至10代左右便会出现生长停滞 C．动物细胞培养都能够传到40～50代 D．动物细胞培养主要体现细胞的增殖
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| 13. 难度：中等 | |
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关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述，错误的是 A.动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同 B.动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶 C.烟草叶片离体培养能产生新个体，小鼠杂交瘤细胞可离体培养增殖 D.动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖培养可用于植物脱除病毒
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| 14. 难度：中等 | |
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下列叙述，正确的是 A．目前在实验中，科学家可以用类似植物组织培养的方法获得完整的动物个体 B．体细胞的细胞核移植到受体细胞之前，要先去掉受体卵母细胞的核 C．用于核移植的供体细胞一般都选用传代50代以内的细胞 D．用体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细胞供体动物进行100%的复制
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| 15. 难度：中等 | |
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下列有关细胞工程的叙述中正确的一项是 A．克隆不是无性繁殖 B．用动物体细胞克隆动物是通过核移植实现的 C．灭活病毒通过溶解磷脂双分子层，诱导动物细胞融合 D．动物细胞培养与植物组织培养都是用的液体培养基
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| 16. 难度：中等 | |
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下列有关现代生物科技的叙述中，错误的是 A.胚胎移植技术的优势是可以充分发挥雄性优良个体的繁殖潜力 B.动物细胞融合技术开辟了制备单克隆抗体的新途径 C.利用基因工程技术可以使哺乳动物生产人类所需的药品 D.植物体细胞杂交技术克服了不同生物远缘杂交不亲和的障碍
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| 17. 难度：简单 | |
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下列关于胚胎工程的叙述，错误的是 A．体外受精是指获能的精子和成熟的卵子在相应溶液中受精 B．试管婴儿技术主要包括体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植技术 C．早期胚胎培养与动物细胞培养的培养液通常都需加入血清 D．可在培养基中将原肠胚培养成胎儿
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| 18. 难度：中等 | |
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高等哺乳动物受精后不久，受精卵开始进行细胞分裂。经桑椹胚、囊胚、原肠胚和组织器官的分化，最后发育成一个完整的幼体，完成胚胎发育的全过程，如下图为该过程中的某一时期示意图。下列有关叙述不正确的是
A．进行胚胎移植进行“冲卵”时，应选择图示时期之后的胚胎进行 B．高等哺乳动物胚胎发育中的细胞分化开始于图示时期，终止于生命结束 C．胚胎中的②将来发育成胎盘、胎膜 D．图中①②③依次为透明带、滋养层、内细胞团
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| 19. 难度：中等 | |
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动物细胞培养是动物细胞工程的基础，如下图所示，a、b、c表示现代工程技术，①②③分别表示其对应的结果，请据图判断下面说法错误的是
A．若b是体外受精技术，则形成②的过程不属于克隆 B．若a是胚胎分割技术，则产生的①中，所有个体的基因型和表现型一定相同(突变体除外) C．若c是核移植技术，则形成③的过程体现了动物体细胞核具有全能性 D．①②③生产过程中的代孕母畜必须与供体母畜同期发情
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| 20. 难度：简单 | |
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下列说法正确的是 A.基因污染是不可增殖的 B.中国政府认可生殖性克隆 C.桑基鱼塘主要体现物种多样性原理 D.小流域治理主要体现协调与平衡及整体性原理
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| 21. 难度：中等 | |
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(13分)Ⅰ．如图表示运用基因工程技术生产胰岛素的三条途径。据图结合所学知识回答下列问题：
(1)为了便于将含有目的基因的细胞筛选出来，所选择的质粒上应该具有__________________。 (2)培育转基因羊的过程中，科研人员通过感染或____________技术将重组质粒M转移到受体细胞A中，受体细胞A应该是________细胞。③过程中还用到了__________________技术。 (3)受体细胞B应该是莴苣的________(填“体细胞”“卵细胞”或“受精卵)，导入该细胞后，需对该细胞进行培养，经________过程形成愈伤组织。 (4)莴苣为双子叶植物，过程②常用的方法是________________；过程⑥常用的方法是用________来处理大肠杆菌，使其易于吸纳重组质粒M。 Ⅱ、下图四种质粒含有E1和E2两种限制酶的识别位点，Apr表示抗青霉素的抗性基因，Tcr表示抗四环素的抗性基因。
(1)将两端用E1切开的APr基因与用E1切开的质粒X-1混合连接，连接后获得的质粒类型有________（2分）。(可多选) A．X-1 B．X-2 C．X-3 D．X-4 (2)若将上图所示X-1、X-2、X-3、X-4四种质粒导入大肠杆菌，然后分别涂布在含有青霉素或四环素的两种培养基上。在四环素的培养基不能生长的大肠杆菌细胞类型有________、________、__________。
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| 22. 难度：中等 | |
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(9分)通过基因工程的方法，科学家采用花粉管通道法将毒蛋白基因转入棉花植株并获得成功表达。棉铃虫吃了这种转基因棉花的植株后就会死亡。花粉管通道法是指：利用植物花粉萌发时形成的花粉管通道将毒蛋白基因送入胚囊，进而导入尚不具备细胞壁的合子或早期胚体细胞中，借助天然的种胚系统，形成含有目的基因的种胚。请回答下列问题： (1)下列所示的黏性末端是由__________（2分）种限制酶作用产生的。
(2)利用花粉管通道法将毒蛋白基因导入棉花细胞，此过程是基因工程操作步骤中的第三步，即__________。获取目的基因时，如果基因比较小，核苷酸序列又已知，则可以通过DNA合成仪用化学方法直接__________。 (3)该目的基因在导入受体细胞前需要与载体结合，目前经常使用的载体是__________。 (4)基因工程操作的第四步是目的基因的检测与鉴定，其中分子水平的检测又分三步：首先要检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因，采用的技术是__________；其次还要检测__________，方法同样是采用分子杂交技术；最后检测__________，方法是__________杂交。
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| 23. 难度：中等 | |
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(11分)“白菜—甘蓝”是科学家用细胞工程的方法培育出来的蔬菜新品种，它具有生长期短、耐热性强和易储存等优点。如图是“白菜—甘蓝”培育过程示意图，请完成下列问题：
(1)培育成白菜—甘蓝植株，采用的技术手段是________。该过程应用的原理是＿＿＿＿＿＿和＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。 (2)要制备“白菜—甘蓝”的人工种子，要在d步骤选取具有生根、发芽能力的________结构，包裹上人工种皮即可。 (3)在d过程培养中，培养基的成分通常包括水、______、有机营养和________等，同时，在培养过程中，除必要的温度、光照和氧气等外界条件外，成功的另一个关键是操作过程中必须保证__________________。 (4)在a过程中诱导原生质体融合最常用的诱导剂是______________． (5)要获得图中白菜和甘蓝的原生质体，首先需要分别除去白菜和甘蓝细胞的细胞壁。用以下材料和用具：紫色洋葱鳞片叶、适宜浓度的蔗糖溶液、纤维素酶和果胶酶、蒸馏水、镊子、显微镜、载玻片等,可除去细胞壁。在实验过程中要选取适宜浓度的蔗糖溶液而不用蒸馏水的理由是 _______________________________________________________(2分)。 （6）采用特异性引物对另两种植物花椰菜和黑芥基因组DNA 进行PCR 扩增，得到两亲本的差异性条带，可用于杂种及纯种植株的鉴定。下图是用该引物对双亲及再生植株1—4 进行PCR 扩增的结果。据图判断，再生植株1—4 中后代性状不分离的是 。
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| 24. 难度：中等 | |
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（8分）科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导性多能干细胞（iPS），继而利用iPS细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠，流程如下：
（1）从黑鼠体内获得体细胞经诱导因子的作用成为具发育的 的细胞，其培养过程经历 和 培养。 （2）在胚胎卵裂过程中，总体积 、有机物总量 ；孵化发生在 。 （3）克隆鼠与黑鼠的遗传物质 （完全相同、部分相同）, 原因是 。
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| 25. 难度：中等 | |
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（11分) 人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。下图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，请分析回答问题。
(1)制备单克隆抗体过程中要用到________和________技术。 (2)制备单克隆抗体过程中，给小鼠注射的HCG相当于________，使小鼠产生分泌相应________的淋巴细胞，此过程属于特异性免疫中的________免疫 (3)在细胞内DNA的合成一般有两条途径，主途径是在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸，进而合成DNA，而氨基嘌呤可以阻断此途径。另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下，经酶催化作用合成DNA，而骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径。 ①利用DNA合成途径不同的特点配制的HAT培养基含有多种成分，其中添加的________(2分)成分具有筛选杂交瘤细胞的作用。 ②在HAT培养基上存在_________种细胞，最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是____________________________________(2分)。 (4)此过程生产的单克隆抗体可以与____________特异性结合，从而诊断早孕。
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| 26. 难度：中等 | |
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(8分)、试管动物技术正广泛应用于畜牧业生产。请根据试管牛的生产流程图回答相关问题：
(1)①②过程分别表示________、________。 (2)对供体牛的要求是__________________________，通常母牛每次只排出一枚卵母细胞，可用________激素对其进行超数排卵处理。 (3)从母牛体内获得的卵母细胞需要到________________ (时期)才能与精子结合。在体外培养受精卵时，需要满足以下条件：________、营养、温度和pH以及气体环境。 (4)生产上常用________期的胚胎进行②进程，应用试管动物的优势在于__________。
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