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我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪在东北农业大学的种猪场自然分娩产出,这标志着我国...

我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪在东北农业大学的种猪场自然分娩产出,这标志着我国在转基因克隆猪技术领域已达到世界领先水平。下图为我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图,请据图回答:

(1)一个完整的基因表达载体除了带有绿色荧光蛋白基因以外,还必须含有复制原点、启动子、终止子和________________。启动子是一段有特殊结构的DNA片段,它是___________酶识别和结合的部位;而起始密码子的化学本质则是________(DNA或RNA)。

(2)过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞后,要通过DNA分子杂交技术,来检测绿色荧光蛋白基因是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的__________________上。

(3)从猪中取胎儿成纤维细胞,用__________________处理,然后进行分散培养。培养时,将培养瓶置于含一定量CO2的培养箱中进行培养,CO2的作用是_____________

(4)过程④表示通过显微操作法吸出卵母细胞中的细胞核,微型吸管除了将细胞核吸除外,往往还要将__________________一并吸出。

(5)本实验所用到的现代生物科学技术有____________________________(填序号)。

A.动物细胞培养                       B.胚胎移植

C.胚胎细胞核移植                     D.DNA重组技术

 

标记基因 RNA聚合 RNA 染色体DNA 胰蛋白酶(或胶原蛋白酶) 维持培养液的pH 第一极体 ABD 【解析】试题分析:据图分析,①表示获取绿色荧光蛋白基因,②表示基因表达载体的构建,③表示将目的基因导入受体细胞,④表示去除卵母细胞的细胞核,⑤表示核移植,⑥表示早期胚胎的培养,⑦表示胚胎移植,⑧表示妊娠分娩获得绿色荧光蛋白转基因克隆猪。 (1)基因表达载体含有绿色荧光蛋白基因(目的基因),启动子、终止子和标记基因,其中启动子是RNA聚合识别和结合的部位,启动转录;由于终止密码在mRNA上,所以其本质是RNA。 (2)目的基因(reAnti基因)是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的染色体上,可用DNA分子杂交技术进行检测。 (3)动物细胞培养时,需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理动物组织,使动物细胞分散成单个细胞.动物细胞培养时要放入到95%的空气(保证细胞代谢)和5%CO2(调节培养液的PH)培养箱中。 (4)过程④表示通过显微操作法吸出卵母细胞中的细胞核,微型吸管除了将细胞核吸除外,往往还要将极体一并吸出。 (5)绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程涉及到的现代生物技术有动物细胞培养、胚胎移植、胚胎细胞核移植等。 【点睛】本题通过转基因猪的获得过程来考查基因工程、动物细胞培养、细胞核移植、早期胚胎培养和胚胎移植等技术,要求考生具有一定的识图能力和理解能力,考生要识记基因工程的操作工具;明确目的基因能够与质粒发生重组的原因;识记卵细胞的特点等。  
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考点分析:
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人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘产生的一种激素,下图是制备抗HCG单克隆抗体的过程,请回答相关问题:

(1)注射的X物质是________,可从小鼠最大的免疫器官中获取B淋巴细胞,这个器官的名称是______。能用于动物细胞促融,但不能用于植物细胞促融的方法是_______________

(2)该实验不直接培养B淋巴细胞的原因是_________。细胞融合会出现多种情况,其中能在选择培养基中生长的两两融合的细胞是________,选择培养过程使用的培养基应是_______(填“固体”或“液体”)培养基。

(3)乙细胞还需专一抗体的检测才能得到丙,可能的原因是______________________。由图示过程最终得到的丙细胞应该具有的两大特点是_____________________________

 

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在20世纪初,科学家用植物细胞杂交方法,将白菜的原生质体和甘蓝的原生质体融合,成功地培育出了“白菜﹣甘蓝”杂种植株,据图回答下列问题:

(1)过程b完成的标志是__________。要促进杂种细胞的分裂生长,培养基中应有营养物质和激素,其中激素包括__________两类植物激素。

(2)在利用杂种细胞培育成为杂种植株的过程中,依据的原理是_________,c涉及的分裂方式为___________________

(3)若白菜细胞内有m条染色体,甘蓝细胞含n条染色体,则“白菜﹣甘蓝”细胞内含____条染色体;若杂种细胞培育成为“白菜﹣甘蓝”植株为四倍体,则此杂种植株的花粉经离体培育得到的植株属于几倍体植株?__________

(4)要制备“白菜﹣甘蓝”人工种子,要选取具有生根发芽能力的__________(结构),包裹上人工种皮制得。

 

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为了增加油菜种子的含油量,研究人员尝试将酶D基因与转运肽基因相连,一起导入油菜细胞并获得了转基因油菜品种。

(1)研究人员依据基因的已知序列设计引物,采用__________法快速扩增从陆地棉基因文库中获取到的酶D基因和从拟南芥基因文库中获取到的转运肽基因。所含三种限制酶(ClaⅠ、SacⅠ、XbaⅠ)的切点如图所示,则用______酶处理两个基因后,可得到______端(填图中字母)相连的融合基因。

(2)将上述融合基因插入如图所示Ti质粒的T—DNA中,构建_________并导入农杆菌中。将获得的农杆菌接种在含__________的固体平板上培养得到含融合基因的单菌落,再利用液体培养基振荡培养,可以得到用于转化的侵染液。

(3)剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间,此过程的目的是____________,进一步筛选后获得转基因油菜细胞,该细胞通过__________技术,可培育成转基因油菜植株。

(4)用________法可检测转基因油菜植株中的融合基因是否成功表达。

 

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科学家们用磷脂制成双分子层的微球体,里面包裹着抗癌药物,外面带上单克隆抗体,制成“生物导弹”。下列有关叙述不正确的是

A单克隆抗体的制备应用了动物细胞融合和动物细胞培养技术

B单克隆抗体的化学本质是蛋白质,特异性强、灵敏度高

C选择培养基上培养出的杂交瘤细胞都能够经专一抗体检验呈阳性

D理论上利用“生物导弹”技术治疗癌症疗效高,毒副作用小

 

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将源自同品系小鼠的癌细胞和正常成纤维细胞融合,所获杂种细胞的后代只要保留成纤维细胞的某些染色体就可表现为正常表型,但若这些染色体丢失则会重新恶变为癌细胞。下列叙述不正确的是

A. 杂种细胞的后代保留的成纤维细胞的某些染色体上有抑制细胞恶性增殖的基因

B. 利用灭活病毒可以诱导动物细胞融合

C. 杂种细胞重新恶变后将失去接触抑制现象

D. 染色体数目的变异会抑制细胞的癌变

 

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