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为探究SHH基因与角化囊肿发生的相关性,科研人员利用SHH基因的非模板链转录合成的RNA作为探针,进行分子杂交实验,以检测SHH基因在角化囊肿中的表达情况。制作RNA探针的基本流程如图所示:

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请回答:

1)步骤①中,需要使用的工具酶有 满分5 manfen5.com                           

2)步骤②中,用    处理大肠杆菌,使之成为________细胞,然后导入重组载体。

3)步骤③中,用添加                的培养基培养大肠杆菌,挑选________选填“蓝色”或“白色”菌落中的大肠杆菌为重组菌。

4)重组载体中SHH基因转录合成RNA探针时,________选填“需要”或“不需要”启动子。将制备的探针加入角化囊肿切片中,探针将与____________________形成杂交带,进而判断SHH基因的       情况。

 

(1)限制酶 DNA连接酶 (2)氯化钙溶液(或钙离子) 感受态 (3)氨苄青霉素 白色 (4)需要 SHH转录形成的mRNA 转录 【解析】 (1)步骤1是构建基因表达载体需要用限制酶和DNA连接酶。 (2)将外源基因导入微生物细胞中需要用氯化钙溶液处理大肠杆菌,使之成为容易接受外源DNA的感受态细胞。 (3)由图分析可知该表达载体上的标记基因是氨苄青霉素抗性,所以应用添加氨苄青霉素的培养基培养大肠杆菌,挑选白色的菌落,因为目的基因插入后破坏了LacZ基因。 (4)转录需要启动子,RNA聚合酶结合到启动子上启动转录,探针会与SHH基因转录形成的mRNA形成杂交带,有杂交带的出现,说明SHH基因转录成功。 【考点定位】本题考查基因工程相关知识,意在考察考生对知识点的识记理解掌握程度。 【名师点睛】知识总结:1. 目的基因导入不同受体细胞的过程 生物种类 植物 动物 微生物 常用方法 农杆菌转化法 显微注射技术 感受态细胞法 受体细胞 体细胞或受精卵 受精卵 原核细胞 转化过程 将目的基因插入到Ti质粒的T­DNA上→农杆菌→导入植物细胞→整合到受体细胞染色体的DNA上→表达 将含有目的基因的表达载体提纯→取卵(受精卵)→显微注射→受精卵发育→获得具有新性状的动物 Ca2+处理细胞→感受态细胞→重组表达载体DNA分子与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA分子 2.目的基因的检测和鉴定    
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考点分析:
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为了调查某河流的水质状况,某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量,并进行了细菌的分离等工作。回答下列问题:

1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间,这样做的目的是                         ;然后,将1mL水样稀释100满分5 manfen5.com倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为393837。据此可得出每升水样中的活菌数为        

2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时,接种环通过          灭菌,在第二次及以后划线时,总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是             

3)示意图AB中,          表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。

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4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养。结果发现:振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是:振荡培养能提高培养液

             的含量,同时可以使菌体与培养液充分接触,提高 满分5 manfen5.com          的利用率。

 

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由苯丙氨酸羟化酶基因突变引起的苯丙氨酸代谢障碍,是一种严重的单基因遗传病,称为苯丙酮尿症PKU,正常人群中每70人有1人是该致病基因的携带者显、隐性基因分别用Aa表示。图1是某患者的家族系谱图,其中Ⅱ1、Ⅱ2、Ⅱ3及胎儿满分5 manfen5.com1羊水细胞DNA经限制酶Msp处理,产生不同的片段kb 表示千碱基对,经电泳后用苯丙氨酸羟化酶cDNA探针杂交,结果见图2。请回答下列问题:

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11、Ⅱ2 的基因型分别为       

2)Ⅲ1 满分5 manfen5.com长大后,若与正常异性婚配,生一个正常孩子的概率为       

3)若Ⅱ2 和Ⅱ3生的第2 个孩子表型正常,长大后与正常异性婚配,生下满分5 manfen5.com PKU 患者的概率是正常人群中男女婚配生下 PKU 患者的     倍(保留到小数点后两位)。

4)已知人类红绿色盲症是伴 X 染色体隐性遗传病致病基因用 b 表示,Ⅱ2 和Ⅱ3色觉正常,Ⅲ1 是红绿色盲患者,则Ⅲ1两对基因的基因型是          若Ⅱ2 和Ⅱ3再生一正常女孩,长大后与正常男性婚配,生一个红绿色盲且为 PKU 患者的概率为      

 

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在某生态系统的调查中,得到以下信息,请根据相关信息作答:

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1)连线:结合图1,并依据能量传递效率10%-20%,请在图2中,将能量①②③④与ABCDE存在的对应关系,用线段连接起来。

2)请在图3中,将能量流经D营养级的示意图补充完整。

3)该生态系统中捕食关系的食物链可以表示为                          ;第二营养级到第三营养级能量的传递效率为      %(保留小数点后1位)。

4)从能量输入和输出角度看,该生态系统输入生物群落的能量将              (选填“增加”、“减少”、“基本不变”),原因是

 

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下图表示流感病毒侵入人体后,免疫调节的某些阶段。请回答:

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(1)细胞a称为        细胞,是由流感病毒作为      刺激相应免疫细胞分化而成。

(2)图中抗体由        合成分泌,该细胞可由B细胞在流感病毒及        共同作用下分化而成。

(3)据图,参与清除流感病毒的免疫类型有                      

 

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为了探究不同光照处理对植物光合作用的影响,科学家以生长状态相同的某种植物为材料设计了A、B、C、D四组实验。各组实验的温度、光照强度和CO2浓度等条件相同、适宜且稳定,每组处理的总时间均为135s,处理结束时测定各组材料中光合作用产物的含量。处理方法和实验结果如下:

A组:先光照后黑暗,时间各为67.5s;光合作用产物的相对含量为50%

B组:先光照后黑暗,光照和黑暗交替处理,每次光照和黑暗时间各为7.5s;光合作用产物的相对含量为70%。

C组:先光照后黑暗,光照和黑暗交替处理,每次光照和黑暗时间各为3.75ms(毫秒);光合作用产物的相对含量为94%。

D组(对照组):光照时间为135s;光合作用产物的相对含量为100%。

回答下列问题:

(1)单位光照时间内,C组植物合成有机物的量        (填“高于”、“等于”或“低于”)D组植物合成有机物的量,依据是                                                 

C组和D组的实验结果可表明光合作用中有些反应不需要        ,这些反应发生的部位是叶绿体的        

(2)A、B、C三组处理相比,随着                 的增加,使光下产生的

能够及时利用与及时再生,从而提高了光合作用中CO2的同化量。满分5 manfen5.com

 

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