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科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗.其技术流程如...

科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗.其技术流程如下图1:

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(1)步骤①中,在核移植前应去除卵母细胞的     

(2)将基因导入ES细胞而不是导入到上皮细胞是因为     

(3)步骤③中,需要构建含有干扰素基因的      .构建前利用PCR技术扩增干扰素基因时,可以从图2中A、B、C、D四种单链DNA片段中选取      作为引物.对干扰素基因片段和质粒进行酶切时,可选用限制酶的组合为     

(4)将步骤③获得的ES细胞在荧光显微镜下观察,选择发      色荧光的细胞进行体外诱导.为检测干扰素基因是否表达,可以采用      的方法.

 

(1)细胞核 (2)ES细胞具有全能性 (3)基因表达载体 B和C HindⅢ和PstⅠ或EcoRⅠ和PstⅠ (4)绿 抗原﹣抗体杂交 【解析】 试题分析:分析图1:①表示核移植过程;②表示早期胚胎培养过程;③表示将目的基因导入ES细胞. 分析图2:该DNA片段含有四种限制酶识别序列和切割位点,其中SamⅠ酶的识别序列和切割位点位于目的基因上. 分析图3:图3为质粒结构示意图,该质粒含有2个标记基因(红色荧光标记基因和绿色荧光标记基因). 【解析】 (1)核移植是将体细胞核移植到去核的卵母细胞中,所以实验前要去除卵母细胞的细胞核. (2)将基因导入ES细胞而不是导入到上皮细胞是因为ES细胞具有全能性. (3)步骤③是将目的基因导入ES细胞,该过程之前需要构建基因表达载体;DNA复制只能从5’到3’,因此构建前利用PCR技术扩增干扰素基因时,可以从图2中A、B、C、D四种单链DNA片段中选取B和C作为引物.由图可知,SamⅠ酶的识别序列和切割位点位于目的基因上,用该酶切割会破坏目的基因,因此对干扰素基因片段和质粒进行酶切时,可选用限制酶HindⅢ和PstⅠ或EcoRⅠ和PstⅠ. (4)用限制酶HindⅢ和PstⅠ或EcoRⅠ和PstⅠ切割时会破坏红色荧光蛋白基因,但不会破坏绿色荧光蛋白基因,因此将步骤③获得的ES细胞在荧光显微镜下观察,选择发绿色荧光的细胞进行体外诱导.为检测干扰素基因是否表达,可以采用抗原﹣抗体杂交法. 故答案为: (1)细胞核 (2)ES细胞具有全能性 (3)基因表达载体 B和C HindⅢ和PstⅠ或EcoRⅠ和PstⅠ (4)绿 抗原﹣抗体杂交 考点:基因工程的原理及技术;胚胎干细胞的研究与应用.  
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考点分析:
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矮牵牛花色丰富,易于栽培,是世界上销量最大的花卉之一.科研人员尝试通过增加更多控制色素形成的基因(CHS基因)使红花矮牵牛花瓣颜色加深.

(1)科研人员首先从红花矮牵牛的      细胞中提取mRNA,经反转录获得CHS基因.然后将CHS基因与      结合,通过      转化法,将其导入植物叶片中.将筛选出的成功导入CHS基因的叶片利用      技术培育获得转基因的矮牵牛植株.

(2)与预期结果相反,许多转基因植株的花色为白色.为探究其原因,研究人员从白花转基因植株和红花(非转基因)矮牵牛植株的细胞中分别提取总RNA,然后以      作为探针进行分子杂交,结果发现转基因植株中CHS基因的RNA量减少.由此推测,生物体外源CHS基因的转入并未增加CHS基因的表达,甚至连细胞的      基因表达也受到抑制,从而使花色为白色.

(3)对上述现象的解释有两种观点.第一种观点认为可能由于      酶未能识别基因首端的      部位,从而不能进行转录.第二种观点认为由于某种原因细胞内转录出了部分与mRNA序列互补的反义RNA,反义RNA与mRNA形成了      ,从而降低了游离mRNA的含量.

(4)科研人员发现自然界中存在一种CHS基因表达受抑制的矮牵牛品种.它的表现型与上述转基因植物相似,研究发现它的细胞中CHS基因转录正常,结合此现象推测,上述对转基因矮牵牛开白花的两种解释中第      种成立的可能性更大.

 

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有机农药苯磺隆是一种除草剂,长期使用会污染环境,研究发现,苯磺隆能被土壤中某些微生物降解.分离能降解苯磺隆菌株的实验过程如图所示.请回答问题:

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(1)微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、            四类,该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源,其原因是     

(2)纯化菌株时,通常使用的划线工具是      .在第二次及以后划线时,总是从上一次的末端开始划线.这样做的目的是     

(3)若要检测土样中的细菌含量,应采用      法.在接种前,随机取若干灭菌后的空白平板培养基先行培养了一段时间,这样做的目的是      .然后,将1mL土壤溶液稀释100倍,在3个平板上分别接入0.1mL稀释液,经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为39、38和37.据此可得出每升土壤溶液中的活菌数为      个.

 

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回答下列问题:

(1)将贮藏的马铃薯(块茎)放入蒸馏水中,水分通过      的方式进入马铃薯细胞,引起马铃薯鲜重增加.随着蒸馏水处理时间延长,该马铃薯鲜重不再增加,此时,马铃薯细胞的渗透压比处理前的     

(2)将高温杀死的马铃薯细胞放入高浓度的NaCl溶液中,      (填“会”或“不会”)发生质壁分离现象.

(3)将发芽的马铃薯制成匀浆,使其与斐林试剂发生作用,生成砖红色沉淀,说明该马铃薯匀浆中含有     

 

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下图是某生态农场生产流程示意图,有关说法合理的是(  )

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A.该生态系统中有4个营养级

B.合理使用农家肥可提高流经该生态系统的总能量

C.该生态系统各营养级之间的能量传递效率大大提高

D.除草、治虫的目的是提高生态系统的抵抗力稳定性

 

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某实验室做了如图所示的实验研究.下列相关叙述中正确的是(  )

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A.与纤维母细胞相比,过程①形成的诱导干细胞的全能性较低

B.单克隆抗体不需细胞膜上载体蛋白的协助就能释放到细胞外

C.每个Y细胞只产生一种抗体,故过程④不需进行筛选

D.过程②是诱导干细胞的结构和遗传物质发生稳定性差异的过程

 

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