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内皮素(ET)是一种多肽,主要通过与靶细胞膜上的ET受体(ETA)结合而发挥生物...

内皮素(ET是一种多肽,主要通过与靶细胞膜上的ET受体(ETA结合而发挥生物学效应。科研人员通过构建表达载体,实现ETA基因在大肠杆菌细胞中的高效表达,其过程如下图所示,

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图中SNAP基因是一种荧光蛋白基因,限制酶ApaⅠ的识别序列为满分5 manfen5.com,限制酶XhoⅠ的识别序列为满分5 manfen5.com。请据图分析回答:

1进行过程①时,需要加入缓冲液、引物、dNTP和___________酶等。完成过程①②③的目的是

___________。

2过程③和⑤中,限制酶XhoⅠ切割DNA,使___________键断开,形成___________。

3构建的重组表达载体,目的基因上游的启动子是___________的部位,进而可驱动基因的转录。除图中已标出的结构外,基因表达载体还应具有的结构是___________。

4过程⑥要用CaCl2预先处理大肠杆菌,使其成为容易吸收外界DNA的___________细胞。

(5将SNAP基因与ETA基因结合构成融合基因,其目的是有利于检测___________。

 

(1)反转录(逆转录) 获取目的基因(ETA基因) (2)磷酸二酯 黏性末端 (3)RNA聚合酶识别和结合 终止子 (4)感受态 (5)ETA基因能否表达及表达量 【解析】 (1)过程①是以mRNA为模板通过逆转录过程合成cDNA,所以需要加入缓冲液、引物、dNTP和逆转录酶等。完成过程①②③的目的是获取目的基因(ETA基因)。 (2)过程③和⑤中,利用限制酶XhoⅠ切割DNA以获取目的基因,限制酶XhoⅠ切割使DNA的磷酸二酯键断开,形成的黏性末端是。 (3)构建的重组表达载体,目的基因上游的启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位,进而可驱动基因的转录。除图中已标出的结构外,基因表达载体还应具有的结构是终止子等。 (4)过程⑥要用CaCl2预先处理大肠杆菌,使其成为容易吸收外界DNA的感受态细胞。 (5)将SNAP基因与ETA基因结合构成融合基因,其目的是有利于检测ETA基因能否表达及表达量 【考点定位】基因工程  
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考点分析:
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图一为不同地点植物的分布情况,表一是生态学家对某弃耕农田多年后形成的荒地进行的调查,表中是此生态系统三个营养级的能量分析表(单位:J/hm2·a

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1图一c处水域受到重金属污染后,海藻以及多种浮游动物数量锐减,而沙蚕等动物变为优势种群,这是在          水平上研究的结果。

2若要调查b处土壤中小动物类群的丰富度,统计方法可选用                   

3输入表一生态系统生物群落的总能量是          J/hm2·a,这部分能量是由表中          填字母所固定的全部太阳能。

(4该生态系统第二营养级到第三营养级的能量传递效率为          。从表格来看,该生态系统的总能量是否增加?         

 

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下图为两种遗传病系谱图,甲病基因用A、a表示,乙病基因用B、b表示,11—4无致病基因。请根据以下信息回答问题:

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(1甲病的遗传方式为是          ,乙病的遗传方式为          

(2Ⅱ—2的基因型为          ,Ⅲ--l的基因型为         

(3如果 Ⅲ—2与 Ⅲ—3婚配,生出正常孩子的概率为          

(4若基因检测表明I一1也无致病基因,则 Ⅱ-2患乙病的原因最可能是         

(5 Ⅱ—2的一个精原细胞,在减数分裂过程中,由于染色体分配紊乱,产生了一个基因型为AAaXb的精子,则另三个精子的基因型分别为                      

 

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下列对动物核移植技术的描述不正确的是  

A.哺乳动物核移植包括胚胎细胞核移植和体细胞核移植,动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎核移植

B.体细胞核移植的过程中可通过显微操作去核法去除卵母细胞中的核

C.体细胞核移植过程中通常采用MⅡ期卵母细胞作为受体细胞

D通过体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细胞供体动物进行了100%的复制

 

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在利用动物细胞融合技术植被单克隆抗体时,不需要考虑  

A选择的小鼠必须是纯种

B用同种抗原多次注射小鼠

C细胞融合时加入促溶剂

D筛选时采用单细胞培养技术

 

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卵细胞作为生殖细胞,在生物技术中可用于

①克隆动物时细胞核的受体

②形成受精卵,作为培育转基因动物的受体细胞

③动物细胞融合形成单克隆抗体

④植物组织培养形成试管苗

⑤形成受精卵,利用转基因和植物组织培养,培育抗虫棉植株

A①②④       B③④⑤       C①③⑤        D①②⑤

 

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